Η Νταϊάνα γεννήθηκε σε μια οικογένεια της βρετανικής αριστοκρατίας και ήταν το τέταρτο παιδί και τρίτη κόρη του Τζον Σπένσερ, Υποκόμη Όλθοπ, και τηςΦράνσις Σαντ Κιντ. Μεγάλωσε στο Παρκ Χάουζ του Σάντριγχαμ και δέχτηκε εκπαίδευση στην Αγγλία και την Ελβετία. Το 1975, όταν ο πατέρας της απέκτησε τον τίτλο του Κόμη Σπένσερ, εκείνη έγινε γνωστή ως Λαίδη Νταϊάνα Σπένσερ. Για πρώτη φορά ήρθε στο φως της δημοσιότητας το Φεβρουάριο του 1981, όταν ανακοινώθηκε ο αρραβώνας της με τον πρίγκιπα Κάρολο.

Ο γάμος της με τον πρίγκιπα της Ουαλίας έγινε στις 29 Ιουλίου 1981, στον Καθεδρικό Ναό του Αγίου Παύλου στο Λονδίνο, ενώ μεταδόθηκε από την τηλεόραση σε 750 εκατομμύρια ανθρώπους παγκοσμίως. Μετά το γάμο της, η Νταϊάνα απέκτησε τους τίτλους πριγκίπισσα της Ουαλίας, δούκισσα της Κορνουάλης, Δούκισσα του Ρόθσι και κόμισσα του Τσέστερ. 

Οι δύο γιοι που απέκτησε, ο πρίγκιπας Ουίλιαμ και ο πρίγκιπας Χάρι, ήταν τότε στη δεύτερη και την τρίτη θέση αντίστοιχα της γραμμής διαδοχής για το βρετανικό θρόνο. Ως πριγκίπισσα της Ουαλίας, η Νταϊάνα ανέλαβε διάφορα βασιλικά καθήκοντα εξ ονόματος της βασίλισσας Ελισάβετ, εκπροσωπώντας την σε περιοδείες της στο εξωτερικό. Έγινε ιδιαίτερα γνωστή για το φιλανθρωπικό της έργο, όπως η υποστήριξη που παρείχε στη Διεθνή Εκστρατεία Απαγόρευσης των Ναρκών Ξηράς.

 Ασχολήθηκε με δεκάδες φιλανθρωπικά ιδρύματα, συμπεριλαμβανομένου του Νοσοκομείου Γκρέιτ Όρμοντ Στριτ του Λονδίνου, στο οποίο διετέλεσε πρόεδρος από το 1989.

Η Νταϊάνα παρέμεινε στο προσκήνιο των μέσων ενημέρωσης καθ΄ όλη τη διάρκεια του γάμου της, ο οποίος τερματίστηκε με διαζύγιο στις 28 Αυγούστου 1996. Η προσοχή των μέσων ενημέρωσης συνεχίστηκε και κορυφώθηκε μέχρι το θάνατό της σε αυτοκινητιστικό δυστύχημα στο Παρίσι στις 31 Αυγούστου 1997. Η απώλεια της ζωής της προκάλεσε κύμα συγκίνησης σε όλο τον πλανήτη, ενώ η κηδεία της παρακολουθήθηκε μέσω του BBC από 32,10 εκατομμύρια ανθρώπους στο Ηνωμένο Βασίλειο.